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條件性恐懼標準實驗流程 

【摘要】 目的 明確延長創(chuàng)傷后刨傷環(huán)境的暴露時間對單一線索條件性恐懼表達的影響。方法燈光線索條件性恐懼訓練后延長動物在訓練環(huán)境中的停留時間。結(jié)果 創(chuàng)傷后延長環(huán)境暴露時間能夠消除動物對環(huán)境的恐懼，使之不能自發(fā)恢復．并因此抑制了對單一線索的條件性恐懼反應(yīng)，主要表現(xiàn)為在創(chuàng)傷環(huán)境中，延長暴露組動物對燈光線索的條件性恐懼反應(yīng)低于非延長暴露組[恐懼水平分別為(19．531±6．073)％，(46．094±10．427)％]，達到邊緣顯著水平(P=0．085)，且這種恐懼下調(diào)可以持續(xù)至少35d[延長暴露組與非延長暴露組的恐懼水平分別為(21．094土4．897)％，(74．219±9．481)％，尸<0．01]。

【結(jié)論】
延長創(chuàng)傷環(huán)境暴露時間改變了對創(chuàng)傷環(huán)境的“恐懼”表征，從而使創(chuàng)傷環(huán)境作為“安全場景設(shè)置者”降低了對單一線索條件性恐懼的表達，提示在創(chuàng)傷后延長創(chuàng)傷環(huán)境的停留時間，使受害者對環(huán)境的恐懼消失，可能有助于預(yù)防創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙的形成。

【關(guān)鍵詞】 環(huán)境暴露； 環(huán)境條件性恐懼； 單一線索條件性恐懼； 場景設(shè)置； 創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙

【一、材料】
1．動物：雄性SD大鼠16只，初始平均體質(zhì)量(280±10)g。動物在50．0cm×22．5cm×30．0em的不銹鋼籠中群居飼養(yǎng)，每籠4只，自由進水進食。光周期為7：00—19：00，飼養(yǎng)環(huán)境溫度22～24℃，相對濕度40％一60％。正式實驗開始之前，先進行適應(yīng)性飼養(yǎng)l周，適應(yīng)期內(nèi)每天對大鼠進行撫摸使其適應(yīng)主試人員的操作。本實驗所有程序均得到了中國科學院心理研究所倫理委員會認可。
2．設(shè)備：實驗設(shè)備為2個不同的箱子。斯金納操作性條件性反射箱(30cm×21cm×30cm長方體箱子，美國Med公司生產(chǎn))用來條件性恐懼的訓練與創(chuàng)傷環(huán)境恐懼記憶測試，其前后壁由透明有機玻璃構(gòu)成，左右為鋁質(zhì)側(cè)壁，條件性線索信號由右側(cè)側(cè)壁上部兩個刺激燈發(fā)出。底板由18根不銹鋼條構(gòu)成，每根不銹鋼條直徑0．6cm，中心間隔1．5cm，可通由計算機控制的電流。斯金納箱被放在一個隔音的外箱內(nèi)，外箱側(cè)壁的風扇發(fā)出約65dB的噪音，一個紅色的25w燈泡作為環(huán)境照明。自發(fā)運動測試箱為一個35cm×35cm×50cm黑色有機玻璃長方體箱子，一面?zhèn)缺谘b有刺激燈以提供條件性線索，背景照明由15w的黃色燈泡提供，此箱為條件性恐懼記憶測試提供非創(chuàng)傷環(huán)境。實驗過程中，斯金納箱用75％的酒精清潔，自發(fā)運動箱用洗滌劑清潔，以使兩個環(huán)境截然不同。
【二、方法】
1．條件性恐懼訓練與環(huán)境暴露：1周適應(yīng)期結(jié)束后第1天，將大鼠放入斯金納箱與自發(fā)運動測試箱各5min進行適應(yīng)。第2天進行條件性恐懼訓練，訓練時將大鼠放人斯金納箱，先給予3rain適應(yīng)，3rain結(jié)束后給予15次燈光(持續(xù)8S，CS)-電擊(0．8mA，持續(xù)1S，us)的匹配訓練，燈光與電擊同時結(jié)束，每次匹配呈現(xiàn)的間隔為60S。最后1次匹配呈現(xiàn)后根據(jù)大鼠被取出的時間將大鼠分為2組，一組在最后一次匹配呈現(xiàn)后2min取出(非延長暴露組)，一組在90rain(延長暴露組)后取出。
2．條件性恐懼記憶測試(測試一)：條件性恐懼訓練后第2天進行恐懼記憶測試，測試環(huán)境分別為創(chuàng)傷環(huán)境(斯金納箱)與非創(chuàng)傷環(huán)境(自發(fā)運動測試箱)，先進行非創(chuàng)傷環(huán)境測試。測試時先進行3rain環(huán)境暴露，3rain結(jié)束后給予2次燈光。不伴隨電擊，每次燈光持續(xù)8S，2次間隔60S，最后一次燈光結(jié)束后2rain取出大鼠。非創(chuàng)傷環(huán)境測試后進行創(chuàng)傷環(huán)境測試。由于2組大鼠先前訓練后環(huán)境暴露的時間不同，因此會對環(huán)境有不同的恐懼反應(yīng)，為了消退這種恐懼反應(yīng)，先讓2組大鼠暴露于創(chuàng)傷環(huán)境60min。60rain環(huán)境暴露分3個時間段進行，每段20rain，間2rain。最后一個20rain暴露結(jié)束后2rain，正式進行條件性恐懼測試，測試程序與非創(chuàng)傷環(huán)境測試相同。
3．條件性恐懼記憶自發(fā)恢復測試(測試二)：測試一后35d，再次測試動物在創(chuàng)傷訓練環(huán)境與非創(chuàng)傷環(huán)境中的恐懼反應(yīng)。2組動物在兩個環(huán)境中的測試順序分別進行了平衡，一半先在創(chuàng)傷環(huán)境中測，一般先在非創(chuàng)傷環(huán)境中測，測試程序與上同。整個行為程序過程中大鼠的行為被錄像保存。動物的恐懼行為由秒表記錄，表現(xiàn)為除了維持生命的呼吸之外沒有任何的動作，即所謂的“僵直”行為(freez．ing behavior)。本研究所有圖中的縱坐標均為動物
“僵直”行為的時間占全部測試時間段的百分比，即動物的恐懼水平。

4．數(shù)據(jù)統(tǒng)計：條件性恐懼訓練采用單因素重復測量方差分析方法進行統(tǒng)計分析，環(huán)境與燈光線索條件性恐懼采用t檢驗與2×2雙因素方差分析方法進行統(tǒng)計分析，其中環(huán)境條件性恐懼測試的兩個因素分別為組內(nèi)因素測試(測試1，測試2)與組別間因素(延長暴露組，非延長暴露組)，燈光線索條件性恐懼測試中的兩個因素為組內(nèi)因素環(huán)境(創(chuàng)傷環(huán)境，非創(chuàng)傷環(huán)境)與組別間因素(延長暴露組，非延長暴露組)。所有數(shù)據(jù)均由SPSS12．0 forwindows統(tǒng)計軟件包完成。

【結(jié) 果】
一、創(chuàng)傷后立即進行創(chuàng)傷環(huán)境暴露對環(huán)境條件性恐懼記憶表達的影響非延長暴露組與延長暴露組的不同之處在于條件性恐懼訓練后在原訓練環(huán)境中停留的時間不同，延長環(huán)境的暴露時間顯著降低了動物對原創(chuàng)傷環(huán)境的恐懼反應(yīng)(數(shù)據(jù)未呈現(xiàn))。環(huán)境條件性恐懼為刨傷環(huán)境中測試一前60rain暴露中的前3rain(獲得)與最后3rain(消退后)的恐懼水平，以及兩次測試前燈光線索出現(xiàn)前3min的恐懼水平。從圖la可以看出，2組動物對環(huán)境的條件性恐懼的獲得水平相同。訓練后第2天的l h創(chuàng)傷環(huán)境暴露之后，2組動物對環(huán)境的恐懼反應(yīng)基本都消失(即消退后水平)，隨后的測試一也表明2組之間的環(huán)境恐懼水平相同。但在環(huán)境條件性恐懼自發(fā)恢復測試中(圖lb)，方差分析結(jié)果顯示，測試主效應(yīng)顯著(F(1．葛)=9．(136，P<o．01)。組間主效應(yīng)顯著(■舊)=6．709，P<0．05)，測試與組間交互效應(yīng)邊緣顯著(F，．盈，=3．359，P--0．oTs)。簡單效應(yīng)分析表明，菲延長暴露組在兩次測試中恐懼水平差異有非常顯著性(F㈦囂，=9．76，P<0．01)。而延長暴露組在2次測試中環(huán)境條件性恐懼差異無顯著性(P>0.05)。